16S 、18S、ITS 目标区域扩增子二代测序-经典案例-诺禾致源

16S、18S、ITS等扩增子测序（二代）

T Follicular Helper Cells Promote a Beneficial Gut Ecosystem for Host Metabolic Homeostasis by Sensing Microbiota-Derived Extracellular ATP

期刊：Cell Reports
影响因子：8.28
发表单位：Institute for Research in Biomedicine, Universita` della Svizzera Italiana
发表年份：2017年3月

一、研究背景

哺乳动物的肠道微生物能调节宿主的脂肪存储，研究表明肠道中的Tfh细胞能控制IgA的分泌，缺乏P2X7的小鼠导致IgA分泌增加，本文是在缺乏P2X7的小鼠基础上，研究肠道微生物以及代谢情况。

二、方法流程

取材

建库

测序

分析

C57BL/6J， P2rx7 -/- ，
Icos-/-和Cd3e-/-小鼠

构建小片段文库

盲肠样本 16S rRNA V5–V6
1. WT, P2rx7-/-, Icos-/-, 和
Icos-/-P2rx7-/-
Illumina MiSeq platform
2. Tfh细胞转移后的微生物研究
Ion Torrent PGM

1. OTU聚类和分析
2. α-多样性
3. β-多样性
4. 小鼠体重、肺部组织肿瘤形态
以及组织切片观察、血清中淋
巴细胞数量检测等

三、研究结果

1.缺失P2X7的小鼠体重和微生物变化
P2rx7-/-小鼠的体重增加和葡萄糖代谢受损；P2rx7-/-小鼠改变了肠道的微生物，且富集了Lachnospiraceae（与肥胖有关）和Helicobacteraceae，P2rx7-/-小鼠中与肥胖相关的短链脂肪酸(SCFAs)也增加。
2. Tfh细胞调节葡萄糖代谢和微生物组成
通过测定WT和P2rx7-/-中Tfh细胞转移到Cd3e-/-小鼠，万古霉素、氨苄西林、甲硝哒唑 (VAM)处理小鼠，以及移植P2rx7-/-小鼠盲肠的内容物前后小鼠的各种指标的变化，发现 P2rx7-/-小鼠导致脂肪沉积和代谢功能异常，粪便移植恢复Tfh细胞丰度，Tfh细胞通过控制 IgA的分泌来促进产生健康的肠道微生态。

四、研究结论

Tfh细胞中的P2X7受体对于塑造肠道微生物群是很重要的，缺乏P2X7导致肠道中致肥胖的微生物选择性增加，Tfh细胞控制IgA的分泌来促进产生健康的肠道微生态，且P2X7受体识别细菌产生的ATP，从而促进形成有利于宿主代谢稳态的肠道生态系统。