类器官构建与多组学分析一站式服务

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类器官构建与多组学分析一站式服务

严正声明：实验室科服业务不接收《人间传染的病原微生物目录.pdf》中实验活动需在BSL-2及以上实验等级的样本。名录中实验活动需BSL-1实验等级的样本，在送样前需提供样本无感染性或经灭活的声明无潜在感染风险的声明 (中英文）.doc。对于高毒性动物等样品，必须事先通过销售、客服或运营经理与诺禾致源技术人员联系，确定无高致病性和传染性后才能寄送样品。风险提示和注意事项：类器官建库成功率很大程度受样本质量包括样本采集规范、保存、运输、细胞占比及活率、样本类型及患者个体差异等多重因素影响，不承诺100%建库成功，规范执行本手册的采集流程可显著降低类器官构建失败的风险。

样本类型

样本类型	适用场景	参考送样量	注意事项
手术切除组织	实体瘤根治术或姑息切除术	富含肿瘤细胞组织 ≥1g （约1cm×1cm×1cm 组织块3–5块）	肿瘤组织离体后30分钟内完成取样入冰上或4℃预冷的保存液
穿刺活检组织	超声/CT引导下穿刺，肺/肝/乳腺等	18G针，总长度≥3cm（3–5条，每条≥1cm）	穿刺针道应穿过肿瘤核心区域
胸腹腔积液	恶性胸腹水，心包积液	200–500mL（引流液至少50mL）	引流液收集后应在12小时内启动类器官构建
外周血（配合共培养）	免疫共培养	肝素抗凝管（绿头管）×2支，每支5–6mL	常温（4–25℃）保存运输，避免冷冻

样本采集前准备工作
1.送样前沟通（必须步骤） 在计划送样前，请第一时间联系您的专属技术支持，确认以下事项： •研究对象的肿瘤类型、是否有化疗史（近1个月）等信息。 •样本的获取方式（手术/活检/穿刺/积液）及预计手术/操作日期。 •课题的下游实验需求（仅类器官建库、需要药敏、需要配套测序、需要共培养（需额外提供外周血10mL））。 •预期建库例数（单例或队列），如为队列研究，需提前签署框架协议。 •确认实验室已为您发出样本采集套装。
2.伦理与知情同意 送样研究者须在样本采集前完成以下工作： •确认研究方案已通过所在机构伦理委员会审批，伦理批件明确覆盖体外细胞培养及相关分析用途。 •如需发表论文，请确认知情同意书中包含研究结果用于学术发表的授权条款。 •如为医院合作场景，确认患者知情同意书已签署，患者已了解样本用于体外科研模型构建。 ⚠ 诺禾致源不提供面向患者的临床诊断报告，所有数据仅用于科研目的。如合作方需将PDO药敏结果用于临床用药参考，须自行承担相应的医疗合规责任。
3.类器官送样申请单 请在送样前提供《类器官项目样品信息搜集SIF表》，包含以下内容： •研究者基本信息：课题组/科室名称、研究者姓名、联系方式 •样本信息：肿瘤类型、取样方式（手术/活检/积液）、预计送样日期 •研究背景：近1个月是否有化疗史（如有，注明末次化疗时间） •下游需求：建库/鉴定/药敏/测序/其他实验（具体组合进行勾选） •样本无感染性或经灭活后无潜在感染风险声明确认单
4.样本采集套装及快递打包步骤 诺禾致源将提前为合作方寄出标准化采集套装，内含： •5 mL样本保存管（含特制组织运输保存液）×2支 •生物样本标识袋 ×1 客户收到组织保存液后，组织保存液可在-20℃保存，使用前务必在0-4℃进行解冻（效期3个月，有沉淀/冻融后不可使用）；寄样时，先将样本放入装有组织保存液的储存管中，组织尽量在无菌环境下放入保存液中，组织保存液应当浸没组织，然后迅速拧紧储存管盖子，随后用封口膜密封储存管管口。组织保存液寄送样本小Tips：注意：寒冷天气下，可借助保温桶等设备防止组织结冰 ⚠ 组织保存液正常颜色为淡橙红色。若颜色异常（偏黄/偏玫红），请停用并立即联系我们更换。保存液应避免反复冻融，每支仅供一次性使用。
样本采集标准操作规范
1.通用原则 •所有样本采集须在手术室或经消毒处理的治疗室内进行，全程严格无菌操作，避免环境微生物污染； •肿瘤组织离体后须在30分钟内完成取样并置入保存液，离体时间越长细胞活性越低； •取样须明确区分肿瘤组织与正常组织，避开坏死区、脂肪区、纤维化区，选取质地稍硬、色深、无光泽的肿瘤富集区组织； •建议手术前安排专人（住院医/研究生/实验技术员）负责样本采集，并提前熟悉本手册中的操作规范。
2.手术切除肿瘤组织取样 •手术室内提前准备：无菌托盘、手术剪、镊子、样本保存管、生理盐水； •肿瘤组织离体后立即取样：按最大切面切开，取1cm×1cm×1cm组织块3–5块（总量≥1g）； •（可选）如同步送样NGS测序，需额外增加1块1cm×1cm×1cm大小的组织； •用无菌小皿中的生理盐水轻柔冲洗组织块4–5次，去除血液及黏附物； •用镊子将组织块放入样本保存管中（样本须完全沉入保存液，不可浮于液面），拧紧管盖，封口膜密封； •记录采集时间（精确至分钟），核查标识信息完整性； •如不能立即转运进行样本寄送，将组织样本置于2–8℃冷藏暂存，且储存时间不超过12小时。 取样技巧： 肿瘤富集区的组织通常质感稍硬、颜色偏深、无明显光泽、不易被镊子撕裂。过硬且颜色偏白的区域多为纤维组织，肿瘤细胞少；黄色区域为脂肪，建议避开。
3.内镜活检组织取样 •操作内窥镜，至少钳取3块以上组织，总量≥0.6g；如需NGS请额外增加1块； •优先钳取肿瘤核心区域，避开溃疡面及坏死区； •将活检组织直接放入样本保存管，（样本须完全沉入保存液，不可浮于液面），拧紧保存管盖子并用封口膜密封，记录采集时间； •如不能立即进行样本寄送，将组织样本置于2–8℃冷藏暂存，且储存时间不超过12小时。
4.穿刺活检组织取样 •在超声或CT引导下，使用18G穿刺针，穿刺总长度≥3cm（3–5条，每条≥1cm）； •穿刺针道须明确穿过肿瘤实质区域，需有经验医生操作； •将穿刺组织置入样本保存管，密封并记录采集时间； •如不能立即进行样本寄送，将组织样本置于2–8℃冷藏暂存，且储存时间不超过12小时。
5.胸腹腔积液取样 •准备无菌引流袋，贴好条码，注明研究者信息、肿瘤类型及采集时间； •在手术室或消毒治疗室内，无菌操作穿刺抽取或引流收集； •收集200–500mL胸腹水；若引流速度慢，可收集7–8小时内引流液（至少50mL送样）； •密封袋口（封口膜封闭），并记录采集时间，立即置于2–8℃保存，在采集后12小时内将样本送达类器官建模实验室。 ⚠ 积液样本离体后细胞活性下降快，请勿为追求更大体积而延长收集时间。收集完成后请第一时间通知专属技术支持安排样本接收。
6.外周血（配合免疫细胞共培养）取样 •使用肝素钠抗凝绿头采血管，采集肘静脉血10 mL（2管，每管5–6mL）； •颠倒5-8次混匀充分抗凝，记录采集时间； •并立即寄送样本，于4–25℃常温保存运输，禁止冷冻。

7.样本暂存说明（仅适用于特殊情况） 如非必要，不建议暂存样本，当需要暂存时，可参考如下条件。

样本类型	保存温度	最长暂存时限
手术切除组织	2–8℃（禁冷冻	≤ 12小时
内镜活检组织	2–8℃（禁冷冻）	≤ 12小时
穿刺活检组织	2–8℃（禁冷冻）	≤ 12小时
胸腹腔积液	2–8℃（禁冷冻）	≤4小时
外周血（绿头管）	4–25℃常温（禁冷冻）	≤24小时

样本运输
1.请使用顺丰冷链快递（4℃冷藏寄送），全程保持2–8℃，不间断冷链；外周血样本可使用顺丰标准快递常温寄送（4–25℃）； 2.样本寄出后立即通过电话/微信/邮件通知专属技术支持，确保专属技术支持已知晓样本信息，并告知快递单号及预计到达时间； 3.节假日前2天内不建议寄送新鲜组织样本，如有特殊情况请提前与技术支持确认收样安排； 4.胸腹水样本建议优先安排同城当日送达或次日达，避免长途运输中细胞活性损失。