1. 三代微生物

• 1.1 单菌组织样本（细菌，真菌）

  • (1)样本量：菌体≥3g，-80℃保存，干冰寄送。
    (2)样本准备：对数期细菌（50ml）菌液，4000×g 离心 10min（4℃），弃上清，沉淀（离心后至少3g）用无菌水洗 2 次后干冰送样，建议送 2-3个平行，避免一次提取不成功。
    真菌（100mL）菌液，4000×g 离心 10min（4℃），弃上清，沉淀用无菌水 洗 2 次后干冰送样，若是新鲜真菌建议 3g 以上，建议送 2-3个平行，避免一次 提取不成功。
    (3)提取成功的样品类型：鲍曼不动杆菌，沃氏葡萄球菌，肠炎沙门氏菌，埃希氏菌，粪肠球菌，葡萄球菌，不动杆菌，放线菌，链霉菌等。
    (4)注意事项：
    a）甘油保存，需要重新液体培养基（例如 LB）活化到对数期，不可直接送甘油保存的菌株；
    b）不建议送固体培养皿的菌，如是只有固体培养基才能活，可以刮到有 PB 缓冲液的离心管里面，离心，送沉淀 2g 以上；
    c）真菌（5g）大型菇类等，建议送菌丝，不建议送孢子或是子实体，杂合率较高，不利于组装；
    d）样本一定为非灭活样本，灭活会导致核酸严重降解。

• 1.2 三代扩增子组织样本

  • (1)样本量：

    样本类型	建议送样量	最低送样量
    土壤／污泥／沉积物／腐殖质	3-5g	1g
    水体滤膜 （孔径0.22-0.45μm／直径3-4cm）	2-3张	1张
    拭子	3-5个	1个
    瘤胃液／发酵液／组织液 （离心有明显沉淀）	3-5mL	1mL
    粪便／肠道内容物	3-5g	1g
    动物／人组织	1-3g	1g
    血浆	3-5mL	1mL

    (2)样本运输：-80℃保存，干冰寄送。
    (3)提取成功的样品类型

    样本类型	建议送样量	最低送样量
    土壤／污泥／沉积物／腐殖质	3-5g	1g
    水体滤膜 （孔径0.22-0.45μm／直径3-4cm）	2-3张	1张
    拭子	3-5个	1个
    瘤胃液／发酵液／组织液 （离心有明显沉淀）	3-5mL	1mL
    粪便／肠道内容物	3-5g	1g
    动物／人组织	1-3g	1g
    血浆	3-5mL	1mL